بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
حمیده خلج؛ نسیم زرین پنجه؛ مجتبی عسکری زاده؛ هادی کلانتری خلیل آباد؛ جواد شقاقی
چکیده
به منظور بررسی اثر تنش شوری بر خصوصیات رشدی و فیتوشیمیایی در کشت درون شیشهای گیاه قرهداغ (Nitraria schoberi) آزمایشی در قالب طرح فاکتوریل با پایه کاملا تصادفی انجام شد. تیمارها شامل غلظتهای مختلف کلریدسدیم (0، 50 و 100 میلیمولار) و سولفاتسدیم (0، 10 و 20میلیمولار) بود. ابتدا بذرها در شرایط درونشیشهای جوانه دار شدند و سپس قسمتهای ...
بیشتر
به منظور بررسی اثر تنش شوری بر خصوصیات رشدی و فیتوشیمیایی در کشت درون شیشهای گیاه قرهداغ (Nitraria schoberi) آزمایشی در قالب طرح فاکتوریل با پایه کاملا تصادفی انجام شد. تیمارها شامل غلظتهای مختلف کلریدسدیم (0، 50 و 100 میلیمولار) و سولفاتسدیم (0، 10 و 20میلیمولار) بود. ابتدا بذرها در شرایط درونشیشهای جوانه دار شدند و سپس قسمتهای برگهای کوتیلدونی به همراه هیپوکوتیل بذرهای جوانهزده به عنوان ریزنمونه در محیط کشت MS به همراه 2 میلی گرم در لیتر BAP ، 5/0 میلی گرم در لیتر IBA و تیمارهای ذکر شده قرار گرفتند. ریزنمونههای آماده شده در اتاق رشد درشرایط 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی دمای 2±25 قرار داده شدند. پس از 4 هفته طول ساقه، تعداد برگ و میزان فنل و فلاونویید کل اندازه گیری شد. نتایج تجزیه واریانس نشان داد که سطوح مختلف نمک بر شاخصهای رشدی گیاهچهها چون طول ساقه و تعداد برگها و همینطور بر میزان فنل و فلاونوئید کل موجود در بافت برگها تاثیر معنیداری (در سطح 99 درصد) دارد. بر اساس مقایسات میانگین بیشترین طول ساقه (3/4 سانتی متر) و تعداد برگ (5/5) مربوط به محیط کشت فاقد نمک و بیشترین میزان فنل کل (37/35 میلی گرم در گرم) و فلاونوئید کل (6/24 میلی گرم در گرم) مربوط به محیط کشت حاوی 50 میلیمولار کلریدسدیم به همراه 10 میلیمولار سولفاتسدیم بوده است.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
فائزه علی بابایی؛ فروغ سنجریان؛ نیما احمدی
چکیده
در این مطالعه تاثیر سه غلظت از محرک متیلجاسمونات بر تولید متابولیتهای ثانویه و فعالیت آنتیاکسیدانی در ریشهمویین Origanum vulgare بررسی شد. به این منظور، سویه A13 باکتری Agrobacterium rhizogenes برای تهیه لاینهای پایدار ریشهمویین از ریزنمونهها مورد استفاده قرار گرفت. در این راستا، دو محیط همکشتی ( MS و MS تغییر یافته)، دو زمان تلقیح (5 و 10 دقیقه) ...
بیشتر
در این مطالعه تاثیر سه غلظت از محرک متیلجاسمونات بر تولید متابولیتهای ثانویه و فعالیت آنتیاکسیدانی در ریشهمویین Origanum vulgare بررسی شد. به این منظور، سویه A13 باکتری Agrobacterium rhizogenes برای تهیه لاینهای پایدار ریشهمویین از ریزنمونهها مورد استفاده قرار گرفت. در این راستا، دو محیط همکشتی ( MS و MS تغییر یافته)، دو زمان تلقیح (5 و 10 دقیقه) و دوغلظت استوسیرینگون ( صفر و 100 میکرومولار) آزمایش شدند. پس از تکثیر، ریشههایمویین با غلظت های مختلف متیلجاسمونات (1/0، 2/0 و 5/0 میکرو مولار) تیمار شدند. بعد از 24 و 96 ساعت فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی اندازهگیری شد. علاوه بر آن، بیان ژنهایOvTPS2 وOvDXR ، دو ژن کلیدی مسیر MEP، با تکینک Real time PCR بررسی شد. بیشترین نرخ تراریختی در ریزنمونههای کشت شده در MS تغییر یافته، بعد از 10 دقیقه غوطهوری در سوسپانسیون باکتری همراه با استوسیرینگون به غلضت 100 میکرومولار بود. ریشههایمویین تیمار شده با متیلجاسمونات در مقایسه با شاهد بطور معنیداری بیوماس کمتری تولید کردند. همچنین نتایج نشان داد که غلظتهای مختلف متیلجاسمونات، زمان برداشت و همچنین اثر متقابل آنها بطور معنیداری بر میزان فعالیت آنزیمهای کاتالاز، پراکسیداز و سوپراکسیددیسموتاز تاثیر دارند. مقدار بیان ژن OvDXR پس از 24 ساعت از تیمار با 2/0 میکرومولار متیلجاسمونات، افزایش معنیداری داشت، در حالیکه در همین نمونه بیان OvTPS2 بطور معنیداری کاهش یافت. بیان هر دو ژن OvDXR و OvTPS2 پس از 96 ساعت از تیمار 5/0 میکرومولار متیلجاسمونات افزایش معنیداری نشان داد. کاربرد متیلجاسمونات بعنوان یک محرک کارآمد در سیستم کشت ریشهمویین O. vulgare میتواند برای تولید متابولیتهای ثانویه ارزشمند باشد.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
هوشنگ گوهرچینی؛ خدیجه باقری؛ محمدرضا زمانی
چکیده
چکیده
گیاه سرخدار منبع اصلی تولید داروی تاکسول است. پاکلی تاکسول با نام تجاری تاکسول داروی اصلی در درمان سرطانهای مختلف میباشد. بذر این گیاه دارای خواب طولانی و جوانهزنی سخت است و به علت تقاضای بالا و برداشت بیرویه در بعضی مناطق خطر انقراض این گیاه مهم وجود دارد. با توجه به این شرایط، استفاده از ابزارهای بیوتکنولوژی همچون کشت ...
بیشتر
چکیده
گیاه سرخدار منبع اصلی تولید داروی تاکسول است. پاکلی تاکسول با نام تجاری تاکسول داروی اصلی در درمان سرطانهای مختلف میباشد. بذر این گیاه دارای خواب طولانی و جوانهزنی سخت است و به علت تقاضای بالا و برداشت بیرویه در بعضی مناطق خطر انقراض این گیاه مهم وجود دارد. با توجه به این شرایط، استفاده از ابزارهای بیوتکنولوژی همچون کشت بافت و کشت جنین برای تولید نهالهای تازه بهمنظور تکثیر و بهکارگیری این گیاهان تازه در سایر مطالعات آزمایشگاهی ضروری است. در این پژوهش ابتدا در قالب یک طرح آزمایش کاملاً تصادفی با 48 تیمار و سه تکرار مشخص شد که تیمار 21 روز نگهداری بذرها در آب و کشت آنها روی محیط کشت ½ WPM تغییریافته بالاترین جوانهزنی را دارد. در گام بعدی برای کوتاهتر نمودن زمان جوانهزنی، جنینها در محیط استریل جدا شدند و در آب مقطر دو بار استریل روی شیکر یخچالدار به مدت 5 روز در دمای 4 سانتیگراد نگهداری و سپس در دو محیط کشت WPM½ و ½MS کشت شدند. پس از تجزیه واریانس دادهها مشخص شد که اختلاف معنیداری بین تیمارها در سرعت جوانهزنی وجود ندارد پس میتوان نتیجه گرفت با این روش میتوان در مدتزمان کمتری به گیاهچههای جوان و تازه دست یافت.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
منا فراجی هریس؛ محمدرضا واعظی کاخکی؛ نسرین ملانیا؛ محمد آرمین
چکیده
تنشهای غیر زیستی و کالوسزایی میتوانند سبب افزایش ترکیبات فنلی شوند. هدف از این پژوهش افزایش مقدار فنلکل و فعالیت آنتیاکسیدانی در گیاه دارویی عدسالملک (Securigera securidaca) و کالوسهای حاصل از آن بهوسیله تنش فراصوت، در شرایط درون آزمایشگاهی بود. گیاهان در گلخانه رشد کردند. کالوسزایی با محیط کشت MS حاوی 2/2 میلیگرم بر لیتر آلفا ...
بیشتر
تنشهای غیر زیستی و کالوسزایی میتوانند سبب افزایش ترکیبات فنلی شوند. هدف از این پژوهش افزایش مقدار فنلکل و فعالیت آنتیاکسیدانی در گیاه دارویی عدسالملک (Securigera securidaca) و کالوسهای حاصل از آن بهوسیله تنش فراصوت، در شرایط درون آزمایشگاهی بود. گیاهان در گلخانه رشد کردند. کالوسزایی با محیط کشت MS حاوی 2/2 میلیگرم بر لیتر آلفا نفتالیک استیک اسید و 8/8 میلیگرم از 6-بنزیل آمینو پورین انجام شد. تنش فراصوت بر روی گیاه اصلی بهمدت 10، 20 و 30 دقیقه و در طی 15 روز، در شرایط درون آزمایشگاهی اعمال شد. تنش فراصوت بر روی کالوس بهمدت 10 دقیقه و بهمدت 15 روز صورت گرفت. نمونهها در روزهای گوناگون (روز اول، پنجم، دهم و پانزدهم) جمعآوری شدند. سپس نمونهها در آون خشک و عصاره اتانولی از آنها تهیه شد. آزمونهای تعیین مقدار فنلکل و فعالیت آنتیاکسیدانی بهوسیله روشهای Folin-Ciocalteu و Wu بر روی برگهای گیاه اصلی و کالوس آن انجام شد. نتایج نشان دادند بیشترین مقدار فنل کل در گیاه در تنش فراصوت، در روز اول و تیمار 30 دقیقه بود. در تمامی تیمارها، فعالیت آنتیاکسیدانی نسبت به نمونه شاهد کاهش یافته بود. بیشترین مقدار فنلکل در کالوسهای در تیمار تنش فراصوت، در روز پانزدهم مشاهده شد. فعالیت آنتیاکسیدانی در کالوسهای در تنش فراصوت نسبت به نمونه کنترل کاهش یافت؛ بنابراین میتوان نتیجه گرفت که تنش فراصوت در نمونههای این آزمایش سبب افزایش مقدار فنلکل شد اما بر فعالیت آنتیاکسیدانی تأثیری نداشت. همچنین کالوسزایی و تنش فراصوت بهطور همزمان سبب افزایش مقدار فنلکل میگردد.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
مهدیه شجاعی؛ راضیه سرآبادانی
چکیده
التهاب، پاسخ طبیعی سیستم ایمنی بدن در برابر آسیب یا بیماری به عنوان یک مکانیسم دفاعی، در بدن است. سیستم ایمنی بدن سلولهای آسیب دیده، محرکها و پاتوژنها را شناسایی کرده و روند بهبودی را آغاز میکند که این روند ممکن است باعث بروز التهاب در بدن شود. گاهی اوقات التهاب طولانی مدت و پاسخهای ایمنی بیش از حد معمول، باعث بروز عوارض و ...
بیشتر
التهاب، پاسخ طبیعی سیستم ایمنی بدن در برابر آسیب یا بیماری به عنوان یک مکانیسم دفاعی، در بدن است. سیستم ایمنی بدن سلولهای آسیب دیده، محرکها و پاتوژنها را شناسایی کرده و روند بهبودی را آغاز میکند که این روند ممکن است باعث بروز التهاب در بدن شود. گاهی اوقات التهاب طولانی مدت و پاسخهای ایمنی بیش از حد معمول، باعث بروز عوارض و آسیبهای بیشتر و بروز بیماریهای مزمن میشود. در این پژوهش عصاره Brassica oleracea استخراج و وجود سولفورافان با روش GC-MSو MTTدر آن تأیید شد. میزان سمیت عصاره استخراج شده بر لاینهای سلولی، رد شد، بر بیان ژنهای STAT3 و NF-KB مؤثر در مسیر التهاب سیستم ایمنی مورد بررسی قرار گرفت. از دو ژن GAPDH و β-actin به عنوان ژنهای کنترل داخلی، در لاین سلولی عصبی 1321N1 و لاین سلولی HFF به عنوان سلول نرمال استفاده شد. سلولها با دو میلیگرم از عصاره به مدت سه روز تیمار شدند و تغییرات سیستم ایمنی نیز در بیان ژنها، مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که سولفورافان باعث کاهش بیان ژنهای NF-KB و STAT3 شد و هر دو ژن از مهمترین واسطههای التهاب میباشند. بر اساس نتایج بدست آمده در این پژوهش، استفاده از ماده مؤثره سولفورافان میتواند در کاهش علل ایجاد مشکلات بیماران دارای التهاب سیستم ایمنی مؤثر باشد.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
حسین هنری؛ احد هدایتی؛ زهرا مشیری؛ محمدعلی ابراهیمی؛ افسانه منوچهری
چکیده
غاسول صابونی (Saponaria officinalis)، یک گیاه چند ساله از خانوده میخک است. سیستم کشت ریشههای موئین جایگزین مناسبی جهت بهبود تولید ترکیبات با ارزش دارویی میباشد. کاربرد گسترده فناوری نانو در کشت ریشههای موئین، بستری مناسب جهت تولید عناصر فعال میباشد. در این مطالعه، تأثیر غلظتهای مختلف نانوذرات تیتانیوم دیاکسید (0، 10، 20، 30 و 50 میلیگرم ...
بیشتر
غاسول صابونی (Saponaria officinalis)، یک گیاه چند ساله از خانوده میخک است. سیستم کشت ریشههای موئین جایگزین مناسبی جهت بهبود تولید ترکیبات با ارزش دارویی میباشد. کاربرد گسترده فناوری نانو در کشت ریشههای موئین، بستری مناسب جهت تولید عناصر فعال میباشد. در این مطالعه، تأثیر غلظتهای مختلف نانوذرات تیتانیوم دیاکسید (0، 10، 20، 30 و 50 میلیگرم بر لیتر) در زمانهای (24 و 48 ساعت) بر میزان رشد، ظرفیت آنتیاکسیدانی، محتوای فنول و فلاونوئید کل، فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی، برخی از ترکیبات پلیفنول و میزان پروتئین SO6 در ریشههای موئین غاسول صابونی بررسی شد. بیشترین و کمترین میزان وزن تر ریشههای موئین (به ترتیب 09/3 و 96/0 گرم) به ترتیب در محیط کشتهای تیمار شده با 10 و 20 میلیگرم بر لیتر نانوذرات تیتانیوم دیاکسید و مدت زمان تیمار 48 و 24 ساعت مشاهده گردید. بیشترین میزان فنول کل (79/9 میلیگرم گالیک اسید بر گرم وزن تر) و فلاونوئید کل (06/1 میلیگرم کوئرستین بر گرم وزن تر) در ریشههای موئین تیمار شده با غلظتهای 50 و 30 میلیگرم بر لیتر نانوذرات تیتانیوم دیاکسید و به ترتیب مدت زمان تیمار 24 و 48 ساعت بهدست آمد. بیشترین میزان اکثر پلیفنولها از جمله رزمارینیک اسید، سینامیک اسید و روتین در مدت زمان تیمار 24 ساعت تولید شد. بیشترین میزان پروتئین SO6 در غلظت 50 میلیگرم بر لیتر و مدت زمان 48 ساعت بهدست آمد. با بهینهسازی آزمایشگاهی تولید ریشه مویین گیاه غاسول صابونی، می توان SO6 را در فرمانتور تولید نمود.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
علی قنبری؛ محمد رضا عظیمی؛ علیرضا رفیعی؛ پوریا بی پروا؛ محمد علی ابراهیم زاده
چکیده
فلاونوئیدهای گیاهی، پاسخهای مثبتی به تغییرات جغرافیایی بهخصوص ارتفاع از سطح دریا نشان میدهند و با توجه به اینکه گیاه دارویی علف مار (Capparis spinosa) در رویشگاههای مختلف از لحاظ اکولوژیکی پراکنش دارد، لذا در این پژوهش تأثیر ارتفاع بر روی محتوای فلاونوئیدهای ضد سرطانی روتین و کوئرستین در گیاه دارویی علف مار مورد مطالعه قرار گرفت بدینصورت ...
بیشتر
فلاونوئیدهای گیاهی، پاسخهای مثبتی به تغییرات جغرافیایی بهخصوص ارتفاع از سطح دریا نشان میدهند و با توجه به اینکه گیاه دارویی علف مار (Capparis spinosa) در رویشگاههای مختلف از لحاظ اکولوژیکی پراکنش دارد، لذا در این پژوهش تأثیر ارتفاع بر روی محتوای فلاونوئیدهای ضد سرطانی روتین و کوئرستین در گیاه دارویی علف مار مورد مطالعه قرار گرفت بدینصورت که از سه منطقه کوهستانی شهرستان آمل (نمارستاق، دلارستاق و بهرستاق) در چهار ارتفاع با اختلاف ارتفاعهای 150 متری از هم (حداقل 850 و حداکثر 1650 متر) و با سه تکرار در قالب طرح کاملاً تصادفی در تابستان نمونهبرداری انجام شد و از طریق روش اسپکتوفتومتری و HPLC، فلاونوئید کل، روتین و کوئرستین اندازهگیری و بررسی گردید. نتایج از نظر صفات مورد اندازهگیری، اختلاف معنیداری را در مناطق مختلف نشان داد (01/0p≤ و 05/0p≤)، بهنحویکه بیشترین میزان فلاونوئید، روتین و کوئرستین در ارتفاع 1650 متر منطقه سوم (بهرستاق) به ترتیب با 17/0±51/4 میکرومول، 28/0±62/24 و 18/0±91/4 میلیگرم بر گرم وزنتر بهدست آمد. لذا منطقه و ارتفاع کاملاً بر میزان متابولیتهای دارویی علف مار تأثیر مثبت داشت. همچنین معادله خطوط رگرسیون و ضرایب تبیین (91/0r²=، 74/0r²= و 78/0r²=) نشان داد میزان فلاونوئید، روتین و کوئرستین در ارتفاعهای مختلف مناطق نمارستاق، دلارستاق و بهرستاق با افزایش ارتفاع از سطح دریا روندی افزایشی داشته و شیب خط رگرسیون برای هر سه صفت مثبت بود. بنابراین طبیعت بهترین الگو برای بهدست آوردن فلاونوئیدهای ضدسرطانی غلیظتر و با ماهیت مطلوبتر در گیاهان است.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
مهناز عربی باف؛ نادعلی بابائیان؛ نادعلی باقری
چکیده
شنبلیله با نام علمی Trigonella foenum– graecum گیاهی یکساله و دو لپهای از تیره بقولات است. ریشه، برگ و بذر آن دارای ترکیبات دارویی مهمی میباشد. دستورزی محیطهای کشت سلولی با الیسیتورها یکی از راهکارهای مهم جهت القای متابولیسم ثانویه و تولید متابولیتهای ارزشمند میباشد. سالیسیلیک اسید به عنوان یک الیسیتور غیرزیستی در افزایش تولید متابولیتهای ...
بیشتر
شنبلیله با نام علمی Trigonella foenum– graecum گیاهی یکساله و دو لپهای از تیره بقولات است. ریشه، برگ و بذر آن دارای ترکیبات دارویی مهمی میباشد. دستورزی محیطهای کشت سلولی با الیسیتورها یکی از راهکارهای مهم جهت القای متابولیسم ثانویه و تولید متابولیتهای ارزشمند میباشد. سالیسیلیک اسید به عنوان یک الیسیتور غیرزیستی در افزایش تولید متابولیتهای دارویی مؤثر است. هدف از این پژوهش بررسی اثر سالیسیلیک اسید بر رشد، برخی از شاخصهای فیزیولوژیک و تولید تریگونلین در کشت درون شیشه ای شنبلیله است. کشت سلولی شنبلیله با استفاده از کوتیلدون ژنوتیپ TN-47-155 شنبلیله در محیط جامد MS حاوی 35/0 میلیگرم در لیتر TDZ و 05/0 میلیگرم در لیتر IBA حاصل شد. واکنش سلولها در ارتباط با تولید تریگونلین و دیگر شاخصهای فیزیولوژیک پس از گذشت یک هفته با اعمال سالیسیلیکاسید با غلظتهای 5/12، 25، 50 میلیگرم بر لیتر مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج حاصل از HPLC نشان داد که رشد سلولی و زندهمانی سلولها تحت اثر تیمارها نسبت به شاهد کاهش یافته است. مقدار پراکسید هیدروژن و پراکسیداسیون لیپیدهای غشایی در سلولها نسبت به شاهد تحت اثر تیمارها افزایش یافت. کلیه تیمارها باعث افزایش تولید تریگونلین و فنل کل شدند. تیمار سلولها با غلظت 50 میلیگرم بر لیتر (75 درصد) سالیسیلیک اسید باعث افزایش میزان تریگونلین به میزان دو برابر شاهد (35 درصد) شد. سالیسیلیک اسید می-تواند به عنوان محرک در کشت سلولی شنبلیله به کار رود و باعث القای تولید بیشتر تریگونلین شود.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
منصوره کرمانی؛ بهاره کریمی؛ الهام عزیزی؛ علی معصومی
دوره 8، شماره 21 ، خرداد 1397، ، صفحه 47-57
چکیده
استویا با نام علمی Stevia rebaudiana bertoni یک شیرینکننده طبیعی است که از قند شیرینتر بوده، با این حال میزان کالری آن صفر میباشد و میتواند برای بیماران دیابتی استفاده شود. شیرینی این گیاه به دلیل گلیکوزیدهای انباشته شده در برگ آن است. ریبادیوساید A تا F و استویوساید ترکیبهای اصلی استویا هستند. ژنهای KO وUGT85C2 دو ژن مهم در مسیر بیوسنتز استویول ...
بیشتر
استویا با نام علمی Stevia rebaudiana bertoni یک شیرینکننده طبیعی است که از قند شیرینتر بوده، با این حال میزان کالری آن صفر میباشد و میتواند برای بیماران دیابتی استفاده شود. شیرینی این گیاه به دلیل گلیکوزیدهای انباشته شده در برگ آن است. ریبادیوساید A تا F و استویوساید ترکیبهای اصلی استویا هستند. ژنهای KO وUGT85C2 دو ژن مهم در مسیر بیوسنتز استویول و استویولمونوساید هستند که پیشساز سنتز سایر گلیکوزیدهای استویا میباشند. بهدلیل جوانهزنی ضعیف بذر استویا، کشت بافت سریعترین روش برای تکثیر این گیاه است. بنابراین، بهینه سازی ترکیب محیط کشت غذایی، برای افزایش تولید مواد مؤثرره داروئی در گیاه استویا ضروری است. در این مطالعه، تأثیر محیط MS حاوی غلظتهای مختلف نمک KH2PO4 (0، 25/4، 5/8، 17 و 34 میکرومولار) بر روی بیان ژنهایKO وUGT85C2 به روش RT-PCR نیمهکمی و نیز ظرفیت آنتی-اکسیدانی و میزان قندهای محلول گیاه استویا بررسی گردید. نتایج تجزیه واریانس دادهها نشاندهنده اختلاف معنیدار بین تیمارها در سطح 01/0 بود. مقایسه میانگین تیمارها با روش LSD در سطح 05/0 نشان داد که ژنهای UGT85C2 و KO به ترتیب در غلظتهای 25/4 و 17 میکرو-مولار KH2PO4 بیشترین افزایش بیان را داشتند. همچنین گیاه استویا در غلظت 34 میکرومولار KH2PO4 بالاترین میزان قند محلول و بیشترین فعالیت آنتیاکسیدانی را دارا بود. بهطورکلی با توجه به نتایج این آزمایش بهنظر میرسد که KH2PO4 میتواند باعث افزایش تولید کل قندهای استویا بشود اما تأثیر آن بر روی گلیکوزیدهای مختلف، یکسان نیست و احتمالاً نسبت گلیکوزیدهای مختلف در این گیاه را تغییر میدهد.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
فاطمه اسدی؛ سارا دژستان؛ رباب قهرمانزاده؛ جبرایل رزمجو؛ محمد تقی آل ابراهیم
دوره 5، شماره 10 ، شهریور 1394، ، صفحه 31-40
چکیده
بارکدگذاری DNA روشی ساده برای شناسایی گونهها با استفاده از یک توالی کوتاه ژنتیکی از یک بخش استاندارد ژنوم است. این روش به منظور شناسایی هشت گیاه دارویی جمعآوریشده از استان اردبیل مورد استفاده واقع شد. استخراج DNA به روش تغییریافته CTAB انجام گرفت و PCR با آغازگرهای طراحیشده بر اساس بارکدهای کلروپلاستی rbcL، trnH-psbA، matK و بارکد هستهای ...
بیشتر
بارکدگذاری DNA روشی ساده برای شناسایی گونهها با استفاده از یک توالی کوتاه ژنتیکی از یک بخش استاندارد ژنوم است. این روش به منظور شناسایی هشت گیاه دارویی جمعآوریشده از استان اردبیل مورد استفاده واقع شد. استخراج DNA به روش تغییریافته CTAB انجام گرفت و PCR با آغازگرهای طراحیشده بر اساس بارکدهای کلروپلاستی rbcL، trnH-psbA، matK و بارکد هستهای ITS انجام شد. سپس محصولات PCR خالصسازی و تعیین توالی گردید. درصد موفقیت تکثیر و توالییابی در نمونهها بهترتیب 87 و 62، 75 و 37، 62 و 12، 75 و 37 بهدستآمد. توالیها با نمونههای موجود در پایگاه داده NCBI همردیفشده و تحت تجزیه بیوانفورماتیکی قرار گرفتند. در درخت خویشاوندی گونههای همجنس بر اساس توالیهای بارکدهای rbcL و trnH-psbA از دیگر جنسها تفکیک شدند. همچنین، در بارکد ITS فقط شیرینبیان با گیاهان همجنس خود قرار گرفت. در این مطالعه، گیاه سوسنچلچراغ برای اولین بار با بارکد rbcL بارکدگذاری شد. SNP بارکدهای rbcL (کمتر از 30)، trnH-psbA (کمتر از 100)، ITS (بیشتر از 200) و matK (کمتر از 20) شمارش شد. بنابراین، بارکد rbcL بهدلیل قدرت تفکیک بالا، تعداد SNP پایین و جامعیت در اکثر گونهها، بهعنوان بهترین بارکد معرفی شد. باوجوداین، بارکدهای ITS و trnH-psbA بهدلیل مشکل مرتبط با توالییابی مستقیم محصولات PCR و عدم دسترسی به توالیهای با کیفیت، بهعنوان بارکدهای مکمل شناسایی شدند. بارکد matK بهدلیل قدرت تکثیر و توالییابی پایین برای نمونههای مورد بررسی توصیه نمیشود.
بیوتکنولوژی گیاهان دارویی
سارا عبدخانی؛ محمود سلوکی؛ یعثوب شیری
دوره 4، شماره 8 ، اسفند 1393، ، صفحه 21-30
چکیده
گیاه Ocimum basilicum L. از خانواده نعناعیان است که دارای ترکیبات حلقوی و اسانس بوده و خواص ضد باکتریایی و آنتیاکسیدانی دارد، که سرشار از ترکیبات فنیل پروپانوئیدی است. آنزیم فنیلآلانین آمونیالیاز یکی از آنزیمهای کلیدی در مسیر تولید ترکیبات فنیل پروپانوئیدی میباشد. شواهد نشان میدهد که هورمونهای گیاهی بر بیان ژن در گیاهان مؤثر بوده ...
بیشتر
گیاه Ocimum basilicum L. از خانواده نعناعیان است که دارای ترکیبات حلقوی و اسانس بوده و خواص ضد باکتریایی و آنتیاکسیدانی دارد، که سرشار از ترکیبات فنیل پروپانوئیدی است. آنزیم فنیلآلانین آمونیالیاز یکی از آنزیمهای کلیدی در مسیر تولید ترکیبات فنیل پروپانوئیدی میباشد. شواهد نشان میدهد که هورمونهای گیاهی بر بیان ژن در گیاهان مؤثر بوده و موجب افزایش تولید متابولیتهای ثانویه میگردند. علاوه بر این سیستم دفاعی گیاه را از طریق فعالسازی رونویسی ژنهای مرتبط با مکانیسم دفاعی گیاه تحریک نموده باعث تنظیم مقاومت القایی میگردند. در این تحقیق، بیان ژن فنیلآلانینآمونیالیاز و فعالیت آنزیم فنیلآلانینآمونیالیاز در گیاه ریحان تحت تیمار هورمونهای اسید جیبرلیک، اسید جاسمونیک و اسید سالیسیلیک با غلظت 1/0 میلیمولار در لیتر با روش Real Time PCR در مراحل رشدی گیاهچهای، پیشگلدهی و گلدهی مورد بررسی قرار گرفت. اختلاف سطوح بیان ژن با روش دانکن در سطح 05/0P≤ مقایسه و آنالیزها توسط نرم افزار SAS v9 صورت گرفت. نتایج نشان دهنده افزایش در میزان بیان ژن و فعالیت آنزیم فنیلآلانینآمونیالیاز در تیمار هورمون اسید جاسمونیک در مرحله گلدهی بود. بیان ژن فنیلآلانینآمونیالیاز بین تیمار هورمونهای اسید جیبرلیک، اسید جاسمونیک و اسید سالیسیلیک و نمونه شاهد در سطح احتمال 5 درصد معنادار بود. تیمار اسید جاسمونیک، اسید جیبرلیک و اسید سالیسیلیک باعث افزایش بیان ژن و فعالیت آنزیم فنیلآلانینآمونیالیاز شد.