دانشگاه پیام نور
فصلنامه علمی زیست فناوری گیاهان زراعی
2252-0783
2322-4819
5
11
2015
11
22
ارزیابی گیاه تراریخت کلزای بیانکننده پروتئین نوترکیب از زیر واحد B سمهای STX2 و CTX باکتریهای اشریشیا کلای و ویبریوکلرا
1
13
FA
آتنا
مظفری
کارشناس ارشد، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
mozafari97@yahoo.com
روح اله
کاظمی
دانشجوی دکتری، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
rkboors@yahoo.com
جعفر
امانی
دانشیار، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیهالله (عج)، تهران، ایران
jafar.amani@gmail.com
محیات
جعفری
کارشناس ارشد، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
mahyat_j@yahoo.com
علی
هاتف سلمانیان
استاد، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیستفناوری، تهران، ایران
salman@nigeb.ac.ir
بیماریهای اسهالی یکی از مهمترین معضلات بهداشت جهانی، در تمامی ردههای سنی مطرح میباشند. از میان عوامل ایجاد کننده این بیماریها می-توان به Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) وVibrio cholerae اشاره کرد. در گروه EHEC سروتایپ O157:H7، شایعترین عامل ایجاد اسهال، از طریق سم STX2 ایجاد بیماری میکند. در ویبریوکلرا نیز توکسین CTX منجر به بروز بیماری میگردد. هر دوی این سموم دارای ساختار AB5 هستند. با توجه به غیر سمی بودن زیرواحد B و ایمنیزایی ذاتی این زیرواحد، میتوان آن را کاندیدای مناسبی برای ایجاد ایمنی علیه این سموم معرفی کرد. بذور گیاهان رآکتور زیستی مناسبی برای تولید ایمونوژنهای نوترکیب محسوب شده و پروتئینهای بیگانهای که در گیاه بیان میشوند می توانند ساختار اصلی خود را حفظ میکنند. در این تحقیق بیان پروتئین نوترکیب متشکل از زیرواحد اتصالی دو سم کلرا و STX2 با ترجیح کدونی گیاه بهعنوان کاندیدای یک ایمونوژن خوراکی در بذر بررسی شد. بدین منظور قطعه ژنی sc (stx2B و ctxB) به ناقل بیانی گیاهی تحت کنترل پیشبرنده اختصاصی بذر کلزا FAE (Fatty Acid Elongase) منتقل و پس از تائید حضور سازه ژنی با روشهای مولکولی، به اگروباکتریوم تومی فاشینس جهت تراریختی گیاه انتقال و جهت بیان پروتئین به گیاه کلزا منتقل شد. پس از تأیید تراریختی، میزان بیان گیاهی پروتئین نوترکیب در بذر به روش الایزا ارزیابی و میزان پروتئین حدود 40 میلیگرم در یک گرم بذر تخمین زده شد. نتایج این تحقیق بیانگر کارایی بالای استفاده از بذر برای تولید پروتئین نوترکیب میباشد.
گیاه کلزای تراریخت,EHEC,ویبریوکلرا,ایمونوژن خوراکی
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2647.html
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2647_7df0637f1149289db19c6fa9236de418.pdf
دانشگاه پیام نور
فصلنامه علمی زیست فناوری گیاهان زراعی
2252-0783
2322-4819
5
11
2015
12
10
جداسازی، شناسایی و مطالعه تنوع ژنتیکی جدایههای قارچ Bipolaris sorokiniana (Sacc.) Shoen. عامل بیماری لکهسوختگی گندم با استفاده از نشانگرهای مولکولی
15
27
FA
اسرین
آغه میری
دانشآموخته مقطع کارشناسیارشد گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد سنندج، سنندج، ایران
aghamiri70@yahoo.com
رحیم
مهرابی
استادیار مؤسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
rahim.mehrabi@gmail.com
رضا
طالبی
استادیار گروه زراعت و اصلاح نباتات، دانشگاه آزاد اسلامی واحد سنندج، سنندج، ایران
rezatalebi56@gmail.com
بیماری لکه سوختگی گندم توسط Bipolaris sorokiniana ایجاد شده و در بسیاری از مناطق جهان به عنوان یکی از مهم ترین بیماری های گندم مطرح است. اطلاعات درباره ساختار ژنتیکی بیمارگرها از اهمیت فراوانی برای انتخاب استراتژی مناسب در کنترل بیماری برخوردار می باشد. در این تحقیق از نمونه های جمع آوری شده از استان های مازندران و گلستان در مجموع تعداد 46 جدایه با موفقیت جدا، خالص و شناسایی شد. آزمایشهای بیماریزایی نیز نشان داد که عامل بیماری قادر به ایجاد علایم تیپیک لکه سوختگی روی رقم حساس بولانی است. بررسی تنوع ژنتیکی قارچ عامل بیماری با استفاده از 17 نشانگر ISSR و RAPD نشان داد که از تعداد 179 باند تکثیر شده 98 باند آن چندشکل بودند. میانگین باندهای تولید شده توسط این نشانگرها 4/10 باند و میانگین باندهای پلی مورف 6/5 با ازای هر نشانگر محاسبه شد. میانگین ارزش PIC برای نشانگرهای مورد استفاده 32/0 بوده که بیشترین PIC مربوط به نشانگر UBC874 از نوع ISSR با ارزش 41/0 و کمترین آن مربوط به نشانگر OPF2 از نوع RAPD با میزان 18/0 محاسبه شد. تجزیه خوشه ای داده های حاصل از الگوهای باندی نشان داد که جمعیت های این قارچ از تنوع بالایی برخوردار می باشند. بر اساس تجزیه bootstrap جمعیت های قارچی مورد مطالعه با فاصله ژنتیکی زیادی 7 گروه متمایز را تشکیل می دهند. تمایز بالای گروه های متعلق به مناطق مختلف جغرافیایی از یکدیگر نشان میدهد که تفاوت ژنتیکی بالایی بین جمعیتهای قارچی در مناطق مختلف وجود دارد که بیانگر سازگاری جمعیت های قارچی در شرایط اقلیمی متفاوت است.
گندم,لکهسوختگی,نشانگرهای مولکولی,تنوع ژنتیکی,نشانگرهای ISSR و RAPD
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2648.html
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2648_ae1dfde6662f04171d8eae4fda7bf1c0.pdf
دانشگاه پیام نور
فصلنامه علمی زیست فناوری گیاهان زراعی
2252-0783
2322-4819
5
11
2015
12
16
طراحی و ساخت نانوزیست حسگر مبتنی بر فلورسانس برای تشخیص گیاهان تراریخته
29
36
FA
مهدی
دادمهر
استادیار، گروه بیوتکنولوژی، دانشگاه پیام نور
mdadmehr@ut.ac.ir
سید مرتضی
حسینی
دانشیار، گروه مهندسی علوم زیستی، دانشگاه تهران
hosseini_m@ut.ac.ir
بهناز
کروژدهی
دانشجوی دکتری بیوتکنولوژی، دانشگاه تهران
b_korouzhdehi@ut.ac.ir
تشخیص و تعیین کمیت دقیق حضور ژنهای خارجی در گیاهان تراریخته ژنتیکی دارای اهمیت زیادی برای اطمینان از اثربخشی روش انتقال ژن و همچنین تعیین تراریخته بودن گیاه مورد نظر دارد. به این منظور در این تحقیق از یک نانوزیست حسگر مبتنی بر فلورسانس برای تشخیص پروموتر ژن خارجی استفاده گردید. ژن مورد بررسی بخش غنی از گوانین پروموتر 35S CaMV تعیین گردید تا برهمکنش مناسبی با فلوروفور متیلن بلو مورد استفاده داشته باشد. ابتدا نانوذرات مغناطیسی با پوشش طلا مورد استفاده قرار گرفت تا از خصوصیات مغناطیسی آنها برای جداسازی ژنهای مورد بررسی و از لایه طلای اطراف آنها برای اتصال تک رشته پروب DNA استفاده گردد. با اضافه نمودن تک رشتههای هدف مکمل با پروب مورد استفاده نانوزیست حسگر قابلیت شناسایی ژن مورد بررسی در محدوده 7-10×3 تا 9-10×2/2 را با افزایش غلظت پروب نشان داد و حد تشخیص آن معادل 10-10×2/1 تعیین گردید. با توجه به حد تشخیص مطلوب نانوزیست حسگر مورد استفاده در این تحقیق می توان از آن برای بررسی تراریخته بودن گیاهان و بافتهای گیاهی مورد آزمایش بهمنظور اطمینان از موفق بودن فرایند انتقال ژن و همچنین تمایز گیاه مورد نظر از گیاهان دستکاری نشده ژنتیکی استفاده نمود.
نانوزیست حسگر,تشخیص گیاهان تراریخته,فلورسانس
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2658.html
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2658_7f434ae1256612f1f872712e15f07a76.pdf
دانشگاه پیام نور
فصلنامه علمی زیست فناوری گیاهان زراعی
2252-0783
2322-4819
5
11
2015
12
21
بررسی بیان افتراقی پروتئین های محافظ در گیاه آرابیدوپسیس تحت تنش شوری با روش iTRAQ-2DLC-MS/MS و آنالیز شبکه ژنی مربوطه
38
49
FA
محمدامین
باقری
0000-0002-3780-0867
دانشجوی دکتری اصلاح نباتات، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری
cj.mabg@gmail.com
حمید
نجفی زرینی
استادیار و عضو هیئت علمی دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری.
najafi316@yahoo.com
شناسایی و کمیتسنجی پروتئینها و ژنهای بیان شده در شرایط تنش شوری میتواند منجر به درک هرچه بهتر مکانیسمهای پاسخی شود. بدین منظور در این تحقیق از روش پروتئومیکس مقایسهای iTRAQ جهت بررسی تغییرات پروتئینی در شرایط تنش شوری و کمیتسنجی آنها استفاده شد. سپس جهت بررسیهای بیشتر پیرامون عملکرد ژنهای شناسایی شده از اطلاعات بیان ژن و همبیانی در پایگاهداده و آنالیز توالیهای مربوطه استفاده شد. با توجه به نتایج بهدست آمده از iTRAQ-2DLC-MS/MS مجموعهای از پروتئینها از جمله P5CS1، KIN1، KIN2، ERD10، ERD14 و COR47 شناسایی شد. نتایج بیان ژنهای مربوطه نشان داد که بیان این ژنها تنها به تنش شوری محدود نمیشود و در پاسخ به سایر تنشهای اسمزی نیز دخالت دارند. شبکهی ژنی پروتئینهای شناسایی شده با نرمافزار String بررسی گردید. بر اساس نتایج بهدست آمده در طی بیان این ژنها ترکیبات محافظ از جمله مواد محلول سازگار، پروتئینهای دهایدرین و غیره در سلول تولید میشود که حضور آنها منجر به القای مکانیسمهای مقاومت و تحمل در گیاه در برابر تنشهای اسمزی از جمله شوری می شود.
آرابیدوپسیس,پروتئومیکس مقایسهای (iTRAQ),ترکیبات محافظ,شبکه ژنی,شوری
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2659.html
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2659_8256e325af93ea65b57bb0b474be010e.pdf
دانشگاه پیام نور
فصلنامه علمی زیست فناوری گیاهان زراعی
2252-0783
2322-4819
5
11
2015
12
16
بررسی تنوع ژنتیکی لاین های جهش یافته آفتابگردان (Helianthus annuus L.) و شناسایی نشانگرهای AFLP پیوسته با صفات گیاهچه ای تحت شرایط تنش شوری
51
63
FA
حمید
حاتمی ملکی
استادیار گروه زراعت و اصلاح نباتات دانشکده کشاورزی دانشگاه مراغه
hatamimaleki@yahoo.com
مرجان
جنت دوست
دانشآموخته کارشناسیارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشکده زیستفناوری دانشگاه ارومیه
skystars67@gmail.com
رضا
درویش زاده
0000-0001-5991-4411
استاد گروه اصلاح و بیوتکنولوژی گیاهی دانشکده کشاورزی دانشگاه ارومیه
darvish_r2001@yahoo.com
تنش شوری از جمله تنش های غیر زنده تهدید کننده گیاهان است. مطالعه تنوع ژنتیکی گیاهان برای پیشبرد برنامههای به نژادی گیاهی در راستای ایجاد ارقام متحمل به تنش مهم میباشد. در این تحقیق، ابتدا واکنش گیاهچه ای 53 لاین جهش یافته آفتابگردان به همراه والد مادری در سطوح مختلف شوری (صفر، 2، 4، 6 و 8 دسیزیمنسبرمتر) بررسی شد. همچنین، در آزمایش مولکولی تنوع ژنتیکی لاین ها با استفاده از نشانگرهای AFLP مطالعه گردید. نتایج نشان داد که از نظر صفات گیاهچه ای اختلاف معنی دار بین لاین های مورد مطالعه در هر یک از سطوح شوری وجود دارد. با استفاده از 17 ترکیب آغازگری AFLP، تعداد 200 مکان ژنی در جمعیت مورد مطالعه تکثیر یافت. با تجزیه ساختار جمعیت مورد مطالعه، لاین های جهش یافته مورد مطالعه در 2 زیر گروه قرار گرفتند. نتایج مکان یابی ارتباطی نشان داد که تعداد 43 نشانگر ارتباط معنی دار با صفات گیاهچه ای دارند. ضریب تبیین فنوتیپی نشانگرهای شناسایی شده بین 13/0 تا 42/0 متغییر بود.
آفتابگردان,تنش شوری,اشعه گاما,تنوع ژنتیکی,مکانیابی ارتباطی
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2660.html
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2660_19b33eb8b4d864d60e79ac08130d223e.pdf
دانشگاه پیام نور
فصلنامه علمی زیست فناوری گیاهان زراعی
2252-0783
2322-4819
5
11
2015
11
22
بررسی تغییرات برخی از عناصر تغذیه ای پرمصرف، پرولین و پروتئین در گیاه گاو زبان اروپایی (Borago officinalis L) تحت تنش خشکی
65
75
FA
سیمین
زاهدچکووری
گروه زیست شناسی دانشگاه پیام نور، تهران
simin.zahed@yahoo.com
نعمت
قاسم اف
دانشگاه دولتی باکو
گیاه گاوزبان (Borago officinalis L.) یکی از قدیمیترین گیاهان دارویی است که در ایران و سایر نقاط دنیا مورد توجه میباشد. لذا با توجه به اهمیت دارویی این گیاه، وفور اراضی خشک، بررسی توانایی مقابله با تنشهای محیطی توسط این گیاه، ضروری به نظر میرسد تا مطالعه ای با اهداف اثرات تنش آبی برمقدار پروتئین، پرولین و عناصر پرمصرف N,P,S ,K و رشد در شرایط هیدروپونیک انجام گیرد. نتایج نشان داد پروتئین و وزنتر و خشک ریشه و بخشهای هوایی گیاهان تحت تیمار تنش آبی نسبت به گیاهان شاهد کاهش یافت که این کاهش در بخشهای هوایی معنیدار بود، مقدار K در ریشه کاهش و در بخشهای هوایی افزایش و مقادیر عناصر پر مصرف S, P, N در ریشه افزایش و در بخشهای هوایی کاهش یافت. بیوسنتز پرولین در برگ و ریشه با اعمال تنش خشکی نسبت به شاهد افزایش معنیداری یافت. تنش خشکی باعث کاهش مقدار پروتئین در اندام هوایی و ریشه نسبت به گیاه شاهد شد.
گاو زبان اروپایی (. Borago officinalis L),پرولین,پروتئین,عناصر تغذیه ای,تتش خشکی
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2701.html
https://cropbiotech.journals.pnu.ac.ir/article_2701_8eb24ba7b9a288e978857e56e742b7f0.pdf