بیوتکنولوژی بیماریهای گیاهی
ندا اصغری؛ داود کولیوند؛ امید عینی
چکیده
ویروس موزاییک خیار Cucumber mosaic virus (CMV) گونه شاخص جنس Cucumovirus از خانواده Bromoviridae است. در این تحقیق بیان برخی ژنهای مرتبط با رشد و نمو و متیلاسیون در یک رقم حساس گوجهفرنگی آلوده به ویروس موزاییک خیار بررسی شد. برای آلودهسازی گوجهفرنگی از همسانههای آلودهگر جدایه استاندارد Fny ویروس موزاییک خیار استفاده شد. بدین منظور پس از تهیه نسخههای ...
بیشتر
ویروس موزاییک خیار Cucumber mosaic virus (CMV) گونه شاخص جنس Cucumovirus از خانواده Bromoviridae است. در این تحقیق بیان برخی ژنهای مرتبط با رشد و نمو و متیلاسیون در یک رقم حساس گوجهفرنگی آلوده به ویروس موزاییک خیار بررسی شد. برای آلودهسازی گوجهفرنگی از همسانههای آلودهگر جدایه استاندارد Fny ویروس موزاییک خیار استفاده شد. بدین منظور پس از تهیه نسخههای رونویسی شده از همسانههای آلودهگر آرانای یک، دو و سه ویروس موزاییک خیار، رونوشتها ابتدا روی توتون در مرحله چهاربرگی مایهزنی شدند و پس از ظهور علائم و ایجاد آلودگی، عصاره گیاه توتون آلوده بهصورت مکانیکی روی گوجه فرنگی در مرحله چهاربرگی مایهزنی شد. پس از بروز علائم در چندین مرحله از گیاهان آلوده در فاصلههای زمانی 7، 14 و 21 روز پس از مایهزنی، نمونهبرداری از برگهای آلوده انجام گرفت. پس از استخراج آرانای کل از گیاهان دارای علائم حضور ویروس با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ویروس منطبق بر بخشی از ژن پروتئین پوششی تأیید شد. بیان برخی از ژنهای مرتبط با دفاع و متیلاسیون مانند Hsp90، AGO1 وAGO4 توسط Real Time PCR اندازهگیری شد. نتایج نشان داد که میزان بیان برخی از ژنها مانند HSP90 در گوجهفرنگیهای آلوده کاهش یافته بود. همچنین بیان ژن AGO1، در روز هفتم و چهاردهم پس از آلودگی در مقایسه با گیاه سالم افزایش یافت، در حالیکه در روز 21 پس از آلودگی میزان بیان این ژن نسبت به گیاه سالم کاهش یافت. بیان AGO4 در گیاهان آلوده به ویروس موزاییک خیار، در روز هفتم نسبت به گیاه سالم کاهش اما در روز 14و 21 روز پس از آلودگی، افزایش بیان نشان داد. تغییرات بیان ژن در AGO احتمالاً میتواند ناشی از تاخیر در القای این ژن توسط ویروس در مرحله اول بروز علایم باشد.
بیوتکنولوژی بیماریهای گیاهی
ندا خوش خطی؛ امید عینی؛ داود کولیوند
چکیده
با توجه به اهمیت اقتصادی ویروس کوتولگی بوته گوجهفرنگی (TBSV-Tomato bushy stunt virus) در مزارع سراسر جهان، در این پژوهش ارتباط میان قارچ مایکوریزایی Rhizoglomus irregulare و ویروس کوتولگی بوته گیاه گوجهفرنگی بررسی گردید. به این منظور، در زمان نشاکاری گوجهفرنگی، مایه تلقیح مایکوریزا در بستر کشت گیاه اضافه گردید. پس از چهار هفته TBSVبصورت مکانیکی به تیمارها ...
بیشتر
با توجه به اهمیت اقتصادی ویروس کوتولگی بوته گوجهفرنگی (TBSV-Tomato bushy stunt virus) در مزارع سراسر جهان، در این پژوهش ارتباط میان قارچ مایکوریزایی Rhizoglomus irregulare و ویروس کوتولگی بوته گیاه گوجهفرنگی بررسی گردید. به این منظور، در زمان نشاکاری گوجهفرنگی، مایه تلقیح مایکوریزا در بستر کشت گیاه اضافه گردید. پس از چهار هفته TBSVبصورت مکانیکی به تیمارها مایهزنی شد و بررسی شدت علایم بیماری و نمونهبرداری از آن در نقطههای زمانی 19، 25 و 31 روز بعد از مایهزنی انجام گردید. تیمارها شامل گیاهان شاهد (C)، گیاهان آلوده به TBSV (V)، گیاهان مایکوریزایی (M) و گیاهان مایکوریزایی آلوده به ویروس TBSV (MV) بودند. نتایج بررسی علائم ویروسی، با استفاده از شاخص شدت بیماری، بیانگر کاهش شدت بیماری در گیاهان MV در مقایسه با گیاهان V بود. در تأیید این نتایج، میزان تکثیر ویروس نیز در گیاهان MV کاهش معنیداری نشان داد و این کاهش در مراحل پیشرفتهتر بیماری مشخصتر بود. بررسی بیان ژنهای مرتبط با متیلاسیون شامل MET1، HEN1 و ADK توسط تکنیک Real-time PCR نشان داد که این ژنها در گیاهان MV در مقایسه با گیاهان V بصورت معنیدار افزایش بیان داشتهاند. افزایش بیان ژنهای مرتبط با متیلاسیون در گیاهان MV نشان میدهد که مقاومت به ویروس احتمالاً از مسیر متیلاسیون اتفاق میافتد و علاوه بر این تأیید کننده تکثیرکمتر ویروس در گیاهان گوجهفرنگی تلقیح شده با مایکوریزا میباشد.