کشت بافت و ریزازدیادی
پیمان شریفی؛ احمد معینی
دوره 6، شماره 13 ، خرداد 1395، ، صفحه 13-26
چکیده
برخی عوامل موثر بر جنینزایی در کشت میکروسپورهای جداشده کلزا و باززایی گیاهچهها از جنینهای حاصله در آزمایشهایی جداگانه بررسی شدند. آزمایشها به صورت فاکتوریل دو فاکتوره و در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی انجام شدند. در تمام آزمایشها، ارقام در سه سطح شامل گلوبال (Global)، اپشن (Option) و پیاف (PF7045/91) فاکتور اول را تشکیل میدادند. میکروسپورها ...
بیشتر
برخی عوامل موثر بر جنینزایی در کشت میکروسپورهای جداشده کلزا و باززایی گیاهچهها از جنینهای حاصله در آزمایشهایی جداگانه بررسی شدند. آزمایشها به صورت فاکتوریل دو فاکتوره و در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی انجام شدند. در تمام آزمایشها، ارقام در سه سطح شامل گلوبال (Global)، اپشن (Option) و پیاف (PF7045/91) فاکتور اول را تشکیل میدادند. میکروسپورها از غنچههای به طول 4-3 میلیمتر جدا و در محیط کشت NLN-13 کشت شدند. میکروسپورهای کشتشـده به مدت ۱۴ روز در معرض تنش دمایی ۳۰ درجه سانتیگراد و در شرایط تاریکی قرار گرفتند و پس از آن به اتاق رشدی با دمای ۲۵ درجه سانتیگراد و در داخل یک لرزاننده منتقل گردیدند. برای باززایی، جنینهای 35-25 روزه به محیط کشت جامد B5 منتقل شدند و بعد از حدود 20 تا 25 روز، گیاهچههای طبیعی، گیاهچههای غیر طبیعی، جنینهای ریشهدار و جنینهای تغییرنکرده شمارش شدند. در آزمایش اول جنینزایی اثر حجم محیط کشت، رقم و نیز اثرمتقابل آنها معنیدار بود. در رقم گلوبال، حجم 5/12 میلیلیتر محیط کشت با متوسط تولید 5/695 جنین در هر پتریدیش، بیشترین میزان جنینزایی را داشت. در آزمایش دوم جنینزایی، اثر زغال فعال و اثرمتقابل دو فاکتور معنیدار بود. در آزمایش سوم جنینزایی منابع مختلف هیدرات کربن با هم اختلاف معنیدار داشتند. در آزمایش اول باززایی، اسید جیبرلیک اثر معنیدار بر تعداد جنینهای تغییرنکرده، گیاهچههای غیرطبیعی، گیاهچههای طبیعی و جنینهای ریشهدار داشت و اثرمتقابل اسید جیبرلیک و رقم بر گیاهچههای طبیعی معنیدار بود. در آزمایش دوم باززایی، اثرمتقابل عامل ژلی و رقم بر گیاهچههای طبیعی معنیدار بود.
کشت بافت و ریزازدیادی
عبدالرضا باقری؛ فرشته مشیری؛ سارا خسروی نیا
دوره 3، شماره 5 ، اسفند 1392، ، صفحه 53-61
چکیده
زیره سیاه گیاهی چند ساله با خواص دارویی با ارزش است. به منظور غلبه بر موانع اصلاحی موجود در شرایط مزرعه، دستیابی به روشهای باززایی مؤثر، امکان دستورزی ژنتیکی و بهبود صفات را در این گیاه فراهم میکند. تحقیق حاضر با هدف دستیابی به یک پروتکل باززایی معتبر جهت استفاده از آن در برنامههای مهندسی ژنتیک این گیاه انجام شد. پس از بهینه سازی ...
بیشتر
زیره سیاه گیاهی چند ساله با خواص دارویی با ارزش است. به منظور غلبه بر موانع اصلاحی موجود در شرایط مزرعه، دستیابی به روشهای باززایی مؤثر، امکان دستورزی ژنتیکی و بهبود صفات را در این گیاه فراهم میکند. تحقیق حاضر با هدف دستیابی به یک پروتکل باززایی معتبر جهت استفاده از آن در برنامههای مهندسی ژنتیک این گیاه انجام شد. پس از بهینه سازی شرایط ضدعفونی و جوانه زنی بذر، در محیط کشت پایه MS، گیاهچه های لپه ای حاصل شدند. القای کالوس، ریشه زایی و باززایی ریزنمونههای مختلف این گیاهچه ها، در محیط کشت پایه MS حاوی غلظت های متفاوت از تنظیم کنندههای رشدی BAP، NAA و IAA، بصورت فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی با 3 تکرار مورد بررسی قرار گرفتند. با کشت ریزنمونهها در تیمارهای مختلف محیط کشت، فراوانی کالوس زایی، ریشه زایی و باززایی از ریزنمونه ریشه چه افزایش معنی داری داشت. تنظیم کننده های رشدی BAP و NAA بر القای کالوس و تداوم رشد آن موثر بودند. بیشترین فراوانی کالوس دهی و وزن خشک توده کالوس در غلظت های 5/0 یا 1 میلی گرم در لیترBAP و NAA مشاهده شد. فراوانی ریشه زایی غالبا متأثر از تنظیم کننده رشد NAA با غلظت 1 میلی گرم در لیتر بود. همچنین IAAدر باززایی تک مرحلهای موثر شناخته شد. به نحوی که با افزودن 5/0 میلی گرم در لیتر IAA به محیط کشت، کالوس دهی به میزان قابل توجهی کاهش یافته و باززایی ساقه از هر سه ریزنمونه گره لپه ای، هیپوکوتیل و ریشهچه مشاهده شد.
کشت بافت و ریزازدیادی
مریم توکلی؛ مهران عنایتی شریعت پناهی
دوره 3، شماره 4 ، شهریور 1392، ، صفحه 61-68
چکیده
تحقیق حاضر با هدف بهینه سازی بکارگیری تکنیک موتاسیون در جنین زایی میکروسپورهای کلزا انجام شد. هیبریدهای Hyola 401 و Hyola 420 به عنوان مواد گیاهی و موتاژن شیمیایی EMS (اتیل متان سولفونات) استفاده گردیدند. استوک EMS برای غلظت های 1/0، 2/0 و 3/0 درصد با استفاده از محیط کشت NLN13 تهیه و میکروسپورها در غلظت های مورد نظر و با زمان های 30 ، 60 و 90 دقیقه تیمار شدند. ...
بیشتر
تحقیق حاضر با هدف بهینه سازی بکارگیری تکنیک موتاسیون در جنین زایی میکروسپورهای کلزا انجام شد. هیبریدهای Hyola 401 و Hyola 420 به عنوان مواد گیاهی و موتاژن شیمیایی EMS (اتیل متان سولفونات) استفاده گردیدند. استوک EMS برای غلظت های 1/0، 2/0 و 3/0 درصد با استفاده از محیط کشت NLN13 تهیه و میکروسپورها در غلظت های مورد نظر و با زمان های 30 ، 60 و 90 دقیقه تیمار شدند. بعد از اعمال تیمار، میکروسپورها در محیط NLN13 کشت و سپس به مدت 14 روز در دمای °C30 قرار داده شدند. نتایج نشان داد که در هر دو هیبرید در غلظت 1/0% موتاژن و زمان 90 دقیقه بیشترین تعداد جنین ها به دست آمد. هر سه غلظت بکار برده شده از EMS و شاهد در مدت زمان 90 دقیقه از نظر جین زایی اختلاف معنی داری با هم داشتند و هر چه غلظت در این زمان افزایش یافت تعداد جنین های بدست آمده کمتر بود. جنین ها پس از انتقال به محیط B5 همراه با اسید جیبرلیک و نگهداری در دمای °C4 و تاریکی به مدت 10 روز به انکوباتور با دمای °C25 منتقل شدند. گیاهچه های رشد کرده به محیط باززایی B5 بدون اسید جیبرلیک انتقال یافتند. در هر دو هیبرید غلظت 3/0% از EMS که در مدت زمان 90 دقیقه اعمال شده بود، دارای بیشترین میزان باززایی کل بود.