بررسی فعالیت برخی آنزیم‌های آنتی‌اکسیدان و تغییر بیان برخی ژن‌های کیتیناز دفاعی گیاه سیب‌زمینی (Solanum tuberosum. L) پس از تلقیح با کیتین

نوع مقاله : علمی پژوهشی

نویسندگان

1 گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان، خرم‌آباد، ایران

2 دانشگاه شیراز

چکیده

بیماری‌های گیاهی، به ویژه بیماری‌های حاصل از قارچ‌ها و اٌوومیست‌ها، از چالش‌های عمده کشاورزی مدرن جهانی هستند. الگوهای مولکولی مرتبط با پاتوژن (PAMP) مانند کیتین دیواره سلولی قارچ‌ها و اٌوومیست‌ها، باعث تحریک و سیگنال‌هایی در گیاه میزبان می‌شوند که در نهایت منجر به بیان ژن‌های R، تولید گونه‌های اکسیژن فعال و همچنین تولید طیف وسیعی از متابولیت‌ها می‌شوند. تحریک کیتین منجر به بیان ژن‌های مرتبط با دفاع مانند کیتینازها شده و در نهایت باعث تخریب کیتین دیواره سلولی پاتوژن‌ها می‌شود. به‌منظور ارزیابی سطح بیان تعدادی از ژن‌های کیتیناز و اندازه‌گیری فعالیت برخی آنزیم‌های آنتی‌اکسیدان، برگهای یک ژنوتیپ سیب‌زمینی متحمل به بیماری به نام جلی، در شرایط آزمایشگاهی با الیگومرهای کیتین تلقیح شد. نتایج پژوهش حاضر نشان داد که 48 ساعت پس از تلقیح با کیتین، بیان کلاس‌های مختلف ژن کیتیناز در برگ‌های تیمار شده نسبت به شاهد افزایش معنی‌داری پیدا کرد. ژن‌های کیتیناز کلاس I (با 5/5 برابر افزایش بیان نسبت به شاهد) و ژن‌های کیتیناز کلاس III (با 11/1 برابر افزایش بیان نسبت به شاهد)، به ترتیب بیشترین و کمترین بیان را 48 ساعت پس از تلقیح با کیتین داشتند. با این حال، فعالیت آنزیم‌های انتی‌اکسیدان کاتالاز و آسکوربات‌پراکسیداز تغییر معنی‌داری نسبت به شاهد نداشتند. این نتیجه نشان می‌دهد که استفاده از تیمار کیتین، مسیرهای سیگنال‌دهی درگیر در بیوسنتز آنزیم‌های آنتی‌اکسیدان را در 48 ساعت پس از تیمار کیتین، القا نمی‌کند. همچنین، نتایج مطالعه حاضر نشان می‌دهد که ژن‌های کدکننده کیتینازها را می‌توان با روش‌های مهندسی ژنتیک همسانه‌سازی نمود و در نهایت گیاهان تراریخته مقاوم به پاتوژن‌ها تولید کرد.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عنوان مقاله [English]

Analysing the effects of chitin induction on some antioxidant enzymes activity and change in expression of some defense-related chitinase genes in potato (Solanum tuberosum L.)

نویسندگان [English]

  • Maryam Faramarzi Jafar Beiglou 1
  • Farhad Nazarian-Firouzabadi 1
  • Seyed Sajad Sohrabi 1
  • Ali Moghadam 2
1 Lorestan university
2 Institute of Biotechnology, Assistant professor in plant biotechnology. Shiraz University, Shiraz. Iran
چکیده [English]

Plant diseases, especially fungal and oomycetes associated diseases are major challenges in modern agriculture in the world. Pathogen associated molecular pattern (PAMP) such as some fungi and oomycetes cell wall chitin, elicit or stimulate defence signalling, leading to expression of R-genes, production of reactive oxygen species (ROS) as well as production of a wide range of defence-related metabolites. Chitin elicitors lead to the expression of defence-related genes such as chitinases, consequently leading to pathogens’ cell wall chitin degradation. In order to evaluate the expression level of some chitinases in potato plants and the activity of antioxidant enzymes, leaves of a tolerant potato genotype (jelly) was challenged with chitin oligomers in vitro. Result of this study revealed that 48 hours post chitin induction, the expression of different classes of chitinase genes were significantly increased in comparison with that of control. Class I chitinase (Soltu.DM.10G017450) and class III chitinase (Soltu.DM.11G026160) genes, had the highest (5.5-fold relative to control) and the lowest (1.1-fold relative to control) expression level after 48 hours post chitin inoculation, respectively. Interestingly, the activity of antioxidant enzymes did not change, suggesting that exogenous chitin treatment did not induce signalling pathways involved in antioxidant enzymes biosynthesis. These results may imply that application of chitin does not induce the signaling pathways involved in the biosynthesis of antioxidant enzymes at 48 hours after chitin treatment. Furthermore, the results of the present study illustrated that chitinase genes can be cloned by genetic engineering approaches to generate transgenic plants with enhanced plant pathogens resistance.

کلیدواژه‌ها [English]

  • antioxidant enzymes
  • chitinase genes
  • gene expression
  • potato
  • Real-time PCR